小麥粉中間苯二酚的測定高效液相色譜法（BJS 202009）解讀

來源：中國市場監(jiān)管報

作者：

2023-03-09 10:13:03

原標(biāo)題：小麥粉中間苯二酚的測定高效液相色譜法（BJS 202009）解讀

來源：中國市場監(jiān)管報

原標(biāo)題：小麥粉中間苯二酚的測定高效液相色譜法（BJS 202009）解讀

來源：中國市場監(jiān)管報

一些不法商販在利益驅(qū)使下向小麥粉中添加非食品原料以達(dá)到防腐增白等目的，此類事件對消費(fèi)者的安全健康構(gòu)成風(fēng)險，同時也造成了惡劣的社會影響。間苯二酚就是其中一種被嚴(yán)令禁止加入小麥粉中的非法添加物。

什么是間苯二酚

間苯二酚（英文名Resorcinol）是苯間位兩個氫被羥基取代后形成的化合物，主要用于橡膠黏合劑、合成樹脂、染料、防腐劑、醫(yī)藥和分析試劑等方面，其為許多偶氮染料、毛皮染料的中間體，也是醫(yī)藥中間體對氮基水楊酸的原料。此外，該物質(zhì)還具有殺菌作用，可用作防腐劑，添加于化妝品和皮膚病藥物糊劑及軟膏等。間苯二酚能刺激皮膚、黏膜，同時可經(jīng)皮膚迅速吸收，生成高鐵血紅蛋白而引起發(fā)紺、昏睡和致命的腎臟損傷。長期低濃度接觸，可引起呼吸道刺激癥狀職業(yè)性皮膚損害。

根據(jù)原食藥監(jiān)總局《關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)小麥粉質(zhì)量安全監(jiān)管的公告》（2017年第132號），取得“小麥粉（通用）”生產(chǎn)許可的企業(yè)，不得在小麥粉中添加任何食品輔料；嚴(yán)禁生產(chǎn)企業(yè)在小麥粉中添加過氧化苯甲酰、次磷酸鈉、硫脲、間苯二酚、過硫酸鹽、噻二唑、曲酸等非食品原料。本補(bǔ)充檢驗(yàn)方法可為市場監(jiān)管部門對小麥粉生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)管提供技術(shù)手段，也為食品企業(yè)在原料進(jìn)貨查驗(yàn)、小麥粉出廠檢驗(yàn)等環(huán)節(jié)提供可靠的檢驗(yàn)方法。

方法概述

液相色譜法是一種被廣泛用于各種有機(jī)化合物分離分析的方法，能在較低溫度下將間苯二酚與各種干擾物分離開，從而更準(zhǔn)確地進(jìn)行定量。所以本方法采用液相色譜法測定小麥粉中的間苯二酚含量，稱取5g試樣加入15mL甲醇渦旋混勻，超聲提取15min，放置至室溫后加入1mL亞鐵氰化鉀溶液和1mL乙酸鋅溶液沉淀蛋白，定容混勻后離心，取上清液過有機(jī)相濾膜，待液相色譜測定。采用液相色譜C18-Amide柱分離，熒光檢測器檢測，外標(biāo)法定量。

操作要點(diǎn)

本方法前處理比較簡單，但是仍有以下幾點(diǎn)需要注意：

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在分析方法中的定性定量作用至關(guān)重要，由于間苯二酚標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)易吸潮且見光易氧化，所以需在密封干燥且避光的條件下保存，標(biāo)準(zhǔn)溶液的保存需要冷凍避光。間苯二酚還有兩種同分異構(gòu)體鄰苯二酚和對苯二酚，雖然本方法考察了同分異構(gòu)體對目標(biāo)物的干擾情況，發(fā)現(xiàn)在本方法建立的流動相條件下，三種同分異構(gòu)體能有效分離，但在購買時仍需加以區(qū)分。

間苯二酚易溶于水、甲醇、乙醚等溶劑。首先排除乙醚等易揮發(fā)且對人體傷害比較大的溶劑作為提取劑后，由于小麥粉為高淀粉基質(zhì)，若直接以水為提取劑，樣品的分散性較差，回收率較低。實(shí)驗(yàn)分別以不同比例的甲醇/水為提取劑，比較不同提取劑的提取效率，間苯二酚的提取率隨甲醇濃度增高而增高，當(dāng)甲醇比例到達(dá)80%后，提取率趨于穩(wěn)定。由于樣品吸水性較強(qiáng)，從精準(zhǔn)定量的角度，選擇純甲醇為最優(yōu)的樣品提取劑。

考察前處理沉淀劑對目標(biāo)物回收率及凈化效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加與不加亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀劑對回收率及目標(biāo)物的特異性均無明顯差異。但是，不經(jīng)沉淀處理的樣品溶液在冷藏或長時間放置后會析出沉淀物，不利于批量樣品的同時測定；而經(jīng)沉淀處理的樣品溶液不因放置時間的長短而出現(xiàn)沉淀物。因此，批量測定時，在不能保證立即進(jìn)行儀器分析的情況下，加入沉淀劑可保證溶液在冷藏條件下能夠較長時間保持澄清透明。

間苯二酚是一種既有紫外吸收又有熒光響應(yīng)的物質(zhì)，本方法對其檢測時選用的是熒光檢測器。相對于紫外檢測器，熒光檢測器具有更強(qiáng)的選擇性和更高的靈敏度，能更有效地減少干擾物的影響，同時提高定性定量的可靠性。方法操作簡單、靈敏度高、選擇性好、檢出限低，適用于小麥粉中痕量間苯二酚的定性、定量檢測。

□山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院別梅